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钙黄绿素Calcein活细胞染色专家分享相关事项

 
钙黄绿素Calcein活细胞染色专家细胞活体染色可增加质壁分离实验效果:植物细胞的质壁分离与复原”这一实验,在教科书中指出:该实验材料是紫色的洋葱,不需染色可直接观察到液泡体积大小的变化。洋葱的表皮,实际上只有外表皮呈现出紫色,但对于初学者来说极难取到只有单层细胞的观察材料,多层细胞的材料往往相互重叠呈象,观察效果很不理想。在实践中我们发现洋葱的内表皮的撕取很易获得只具有单层细胞的薄膜材料,但内表皮却又是无色透明的,用其直接作观察材料,显然效果也不理想。我们通过反复摸索,发现对洋葱细胞活体染色后,再取内表皮做质壁分离和复原实验,实验效果就好多了。具体作法如下:用小刀在鳞片内侧划成约2cm2的小块,将取下的小块放入0.03%的中性红色溶液中染色10~15min。取出小块稍加冲洗后,两手握住处理过的鳞片两侧并朝内表皮方向对折。即可露出带红色的薄膜内表皮。用镊子取小片内表皮制片观察,会看到细胞的细胞壁染成了醒目的红色,其他部分仍为无色。此时细胞的原生质与细胞壁的对比十分明显,质壁分离与复原的效果也十分理想。

在操作中我们还发现也可以先单独将内表皮染上颜色,然后放在清水中浸泡十来分钟,可褪去细胞壁的颜色,但染成桃红色的液泡的颜色不会褪去,再将内表皮制片做质壁分离与复原的实验效果更为理想。



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