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公司新闻

羟芪巴脒*DNA和RNA染料

订购信息

存储条件

货号:17514

避免暴露在光线下
保持<-15°C并干燥
到期:收到后12个月


化学和物理特性

结构式:

分子量:472.54

外观:黄色粉末

溶剂:水或0.9% PBS

光谱特性:

激发=360nm,发射=625nm

 

生物应用

Hydroxystilbamidine(也称为Fluoro Gold)用于染色DNA和RNA。 它展出与RNA相比,当与DNA结合时,荧光发射谱具有明显不同。 这种阳离子染料也经常用作逆行神经元示踪剂。

 

 

染色样品方案

Hydroxystilbamidine的使用与其他荧光示踪剂基本相同。 主要区别在于Fluoro-Gold在注射后存活时间,浓度范围,组织**和与其他组织化学技术的兼容性方面更灵活。 它比大多数其他荧光示踪剂更耐褪色,更亮和更持久。

 

操作方法

1.染料浓度:使用1至10%羟基芪脒。 起初,建议浓度为4%。 如果在注射部位不希望发生坏死,或标记太强,则将浓度降低至2%溶液。

2.染料注入:

2.1压力注入 - 这可能是常用的应用模式。 注射的体积范围为0.05-1μl,通常为0.1-0.2μl。

2.2晶体 - 示踪剂的晶体可以从微量移液管的**施用。

3.固定:尽管可以使用任何固定剂或不使用固定剂,但常使用含有4%甲醛的PBS。含有高浓度重金属(如锇,汞)的固定剂会熄灭荧光,而高浓度(超过1%)的戊二醛可能会增加背景荧光。

4.组织处理:含有羟基芪脒的组织可以根据常见的组织学技术进行处理。常使用固定组织的冷冻切片。

5.联用技术在此处理时,可以进一步处理切片用于**标记,例如放射自显影,HRP组织化学,**细胞化学,**荧光示踪剂,荧光复染剂等。

6.切片安装及处理:切片通常安装在涂有明胶的载玻片上,空气干燥,浸入二甲苯中,并用非荧光DPX塑料封固剂盖上盖玻片。 切片可以用分级醇脱水,除非这与**示踪剂不相容。 如果将羟基噻嗪与荧光**细胞化学组合,则将切片风干并直接用DPX盖上盖玻片。

7.检查和摄影:羟基芪脒可以使用宽带紫外激发滤光片(激发 - 323nm,发射 - 中性pH为620nm)用荧光显微镜观察。当用中性pH缓冲液处理组织时发出金色,而当用酸性(例如PH3.3)pH缓冲液处理组织时发出蓝色。它可以用数码机或胶片机拍摄(使用Ektachrome 200-400 ASA胶片进行彩色打印,使用可比较的速度胶片进行黑白打印)。大多数曝光时间范围为10-60秒曝光,具体取决于物镜放大倍数和标签强度。三十(30)秒的暴露是平均的。可以利用多次暴露来同时显现羟基雌二醇和另一种示踪剂。因此,UV将与明场照明组合以同时在放射自显影中定位具有HRP或银颗粒的Fluoro-Gold。类似地,蓝光激发可以组合以也可视化FITC的绿色发**色,而绿色激发光可以用于同时观察碘化丙啶或溴化乙锭(荧光复染剂)的红色发**色。

参考文献

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