Fluo4是一种将Fluo3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换成了电子吸引力更强的F，它的*大激发波长会向短波长处偏离10nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长，所以用氩激光器激发时，Fluo4的荧光强度比Fluo3强1倍。 由于Fluo4与钙离子的亲和力和Fluo3近似(Fluo 3:Kd=0.4 μmol／l、Fluo 4: Kd=0.36 μmol／l)，所以使用上和Fluo3也基本相同，可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪等仪器检测细胞内钙离子浓度的变化。
主要结合dsDNA；结合小沟的AT。DAPI也结合RNA，但其发射峰波长（500nm）要长于DAPI/dsDNA（460nm）。
DAPI dilactate更水溶。在用于组织染色、未固定细胞和组织染色时，下述方法可加以修改。
保存：10mg/单位，室温避光保存，小瓶内至少一年。制stock液，溶解100uM （DAPI dihydrochloride二盐酸化物分子量为350.3；DAPI dilactate分子量为457.5）DAPI于去离子水中或DMF(二甲基甲酰胺)，4℃避光可保存6个月。DAPI是诱变剂，水溶液可通过活性炭去除，要**处理。
染色：在所有染色完成后进行复染，不需要另外的固定和通透处理。
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