今天百萤给大家带了的是经典荧光染料中香豆素的介绍及推荐。哪种香豆素产品使用范围*广？与其他经典荧光染料相比，香豆素有什么优势？希望通过百萤此次的推荐，可以让大家对香豆素有一个新的了解。
香豆素及其衍生物
香豆素和香豆素衍生物是紫外线可激发的蓝色荧光染料，其短发射波长在〜390至〜480 nm范围内。用途*广泛的香豆素包括AMCA、7-氨基香豆素（AFC和AMC）、7-羟基香豆素和7-甲氧基香豆素的衍生物， 它们用于制备蓝色荧光肽、蛋白质和其他生物分子。与荧光素， 罗丹明和花青相比，香豆素由于其相对较低的消光系数而产生中等亮度的荧光，光稳定性比较稳定。蓝光探针*适合用于细胞靶标等高丰度靶标的直接成像、细胞追踪应用、检测酶活性的底物以及某些多色荧光应用-包括**荧光、核酸和蛋白质微阵列、原位杂交和神经元追踪等。
光谱性质
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激发光线：
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405 nm
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滤波器组：
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DAPI
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*大激发光：
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376nm
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*大发射光：
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480nm
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消光系数：
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75,000cm-1 M -1
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量子产率：
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0.53
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图1： AMCA（一种常用的香豆素衍生物）的激发和发射光谱。
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AMCA和Alexa Fluor® 350的*佳替代品iFluor 350
iFluor 350染料是一种与AMCA光谱相似的亮蓝色荧光染料，具有比香豆素更优良的水溶性、光稳定性以及更高的荧光量子产率。iFluor 350缀合物非常适合直接对高丰度靶标成像，在多色应用（例如流式细胞仪和超分辨率荧光显微镜）中特别适用，而不会影响绿色和红色荧光探针的性能。图2.将 HeLa细胞固定在4％甲醛中，然后用iFluor 350鬼笔环肽染色。
表1.iFluor 350与AMCA光谱比较
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荧光产品
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量子产率
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消光系数
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亮度
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iFluor 350
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0.95
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20,000
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**
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AMCA
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0.53
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19,000
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*
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香豆素产品类型
我们提供多种香豆素产品，包括用于标记肽、蛋白质和其他生物分子的活性染料、缀合物、以及用于检测细胞、匀浆和溶液中酶活性的底物。
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7-羟基-4-甲基香豆素 （4-甲基伞形酮）
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7-羟基-4-三氟甲基香豆素
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3-氰基-7-羟基香豆素
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6-氯-8-氟伞形酮 （CF-MU）
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7-氨基-4-三氟甲基香豆素（AFC）
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7-氨基-4-甲基香豆素（AMC）
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2,4-二氟间，苯，二，酚
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4-氟间，苯，二，酚
香豆素活性染料
选择一种染料标记化学试剂以修饰以下反应基团：
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胺
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硫醇
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羧基，羰基和点击化学
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琥珀酰亚胺酯
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iFluor 350
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iFluor 405
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AMCA
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DEAC
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7-羟基香豆素
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7-甲氧基香豆素
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7-羟基-4-甲基香豆素-3-乙酸
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马来酰亚胺
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iFluor 350
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iFluor 405
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AMCA C2
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酶底物
选择一种酶底物，以检测酶促活性：
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半胱天冬酶
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蛋白酶
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肽酶
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磷酸酶
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半胱天冬酶3
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Ac-DEVD-AFC
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Ac-DEVD-AMC
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Z-DEVD-AFC
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Z-DEVD-AMC
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半胱天冬酶8 /颗粒酶B
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Ac-IETD-AFC
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Ac-IETD-AMC
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Z-IETD-AFC
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半胱天冬酶9
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蛋白酶
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Gly-Pro-AMC
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Ala-AMC
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Ac-Pro-Ala-Leu-AMC
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MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC
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Suc-LLVY-AMC
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纤溶酶
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α-凝血酶
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氨肽酶
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内肽酶
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氨肽酶/内肽酶
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Gly-Pro-AMC
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D-Ala-AMC
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Benzoyl-Arg-AMC
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缀合物
选择一种香豆素缀合物进行凋亡检测、细胞器标记：
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二级抗体缀合物
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F-肌动蛋白标记
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凋亡检测
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鬼笔环肽
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AMCA
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iFluor 350
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iFluor 405
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