西安百萤生物科技有限公司 主营:百萤生物围绕荧光发光、荧光标记、荧光探针等技术进行产品研发,公司产品广泛用于核酸蛋白定量、细胞凋亡研究、细胞信号通路研究、细胞及线粒体膜电位检测、细胞器染色、活体示踪、抗体标记等科研领域。
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技术文章

D虫荧光素钾盐体外分析方法的描述

    D-虫荧光素是萤火虫荧光素酶底物,其量子效率为0.88,是Luminol的20倍。反应原理:首先,在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及**计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用,用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。

D虫荧光素钾盐体外分析方法:

    (1)用无菌水配置200×的D-Luciferin储备液(30mg/mL),立即使用,或-20℃保存。

    (2)用预热好的完全培养基1∶200稀释D-Luciferin储备液,配置工作液(150μg/mL)。

    (3)去除培养细胞的培养基。

    (4)进行图像分析前,向细胞中添加1× 的D-Luciferin工作液,进行图像分析。

    (5)溶解D-Luciferin时要完全。

    (6)在图像分析前,将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。

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