Fluo-4 AM是Fluo-4的乙酰甲酯衍生物，是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-4 AM的荧光非常弱，其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。Fluo-4 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4，从而被滞留在细胞内。Fluo-4可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，激发波长为494nm，发射波长为516nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为512-520nm。
1. Fluo-4 AM遇水极易分解，建议**次使用时，母液分装并密封保存，同时注意保持干燥。
2. Fluo-4 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 探针的工作浓度、细胞量、孵育温度和时间等需要根据不同实验预先摸索。
4. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。