D虫荧光素钾盐是荧光素酶的水溶性底物，存在于多种发光生物体中。在ATP和荧光素酶的催化作用下，D-荧光素钾被氧化，产生蓝绿色的光(560nm)，当底物过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关。编码荧光素酶的Luc基因是植物、哺乳动物细胞的常用报告基因。由于没有背景干扰，因此可以很容易地检测出低至0.02 pg 水平的荧光素酶。
培养基操作步骤：
1、 用分子生物学级水准备一个30mg/L（200×）的储存液。
a． 反复巅倒翻转直到荧光素完全溶解。
b． 可以现配现用，或者分装好保存于-20℃。
2、 加配好的荧光素储存液到预温的组织培养基中，使荧光素的终浓度为：150ug/ml。
3、 吸出培养细胞（没有培养基残留）。
4、 在成像前立即加入150ug/ml的荧光素溶液到细胞中。
a． 为了加强信号，在成像前可以把培养好的细胞在37℃中短暂的孵育。
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