西安百萤生物科技有限公司 主营:百萤生物围绕荧光发光、荧光标记、荧光探针等技术进行产品研发,公司产品广泛用于核酸蛋白定量、细胞凋亡研究、细胞信号通路研究、细胞及线粒体膜电位检测、细胞器染色、活体示踪、抗体标记等科研领域。
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产品详情

iFluor 555 蛋白标记试剂盒

  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:iFluor 555 蛋白标记试剂盒
  • 产品型号:AAT-1227
  • 产品展商:AAT Bioquest
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍

能选择性地与蛋白质的氨基集团发生反应,灵敏度高。

产品描述

ReadiLink iFluor 555抗体标记试剂盒

货号                    1227                      存储条件                 f/l                    
规格 2 Labelings 价格 1836
Ex (nm) 556 Em (nm) 569
分子量
溶剂
产品详细介绍

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简要概述

        ReadiLink iFluor 555蛋白标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的*便捷方法。该试剂盒仅需要两个简单的混合步骤而无需纯化步骤。 试剂盒中使用的iFluor 和mFluor 染料的琥珀酰亚胺酯(SE)显示出与蛋白质的脂族胺的良好反应性和选择性,并形成羧酰胺键,其与天然肽键相同且稳定。 iFluor 和mFluor-抗体缀合物可用于**荧光染色,荧光原位杂交,流式细胞术和其他生物学应用。 每个ReadiLink 抗体标记试剂盒都提供了进行两次偶联反应(2x50μg蛋白质)的所有必需成分。 每个试剂盒可用于标记50-100μg单克隆,多克隆抗体或其他蛋白质(> 10 kDa),只需两个简单的混合步骤。ReadiLink iFluor 350蛋白标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

标准操作规程(标记50μg蛋白质)

将所有组分加热并在打开前将样品瓶短暂离心,并在开始结合前立即准备所需的溶液。 以下SOP是标记抗HDAC IgG抗体的实例。


1.准备蛋白质溶液(溶液A):

为了标记50g蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1mg / mL),将5L(总反应体积的10%)的反应缓冲液(组分B)与50L目标蛋白质溶液混合。

注1.如果您的蛋白质浓度不同,请相应调整蛋白质体积,使~50μg蛋白质可用于标记反应。

注2:为了标记100g蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1mg / mL),将10μL(总反应体积的10%)反应缓冲液(组分B)与100μL目标蛋白质溶液混合。

注3:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中;如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中,必须用1X PBS(pH 7.2-7.4)透析,或使用Amicon Ultra-0.5,Ultracel-10膜,10 kDa(来自Millipore的cat#UFC501008)去除广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(如硫酸铵和乙酸铵)。

注4:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好地标记。

注5:如果蛋白质浓度小于1 mg / mL,则结合效率显着降低。为获得*佳标记效率,建议*终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。


2.运行结合反应:

2.1将蛋白质溶液(溶液A)加入一瓶标记染料(组分A)中,通过反复移液几次将其混合均匀,或将小瓶涡旋几秒钟。

注意:使用标记染料的两个小瓶(组分A)通过将100μg蛋白质分成2x50μg蛋白质并使每个50μg蛋白质与一小瓶标记染料反应来标记100μg蛋白质。 将两个小瓶合并用于下一步。

2.2将缀合反应混合物在室温下保持30-60分钟。

注意:如果需要,可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。


3.停止共轭反应:

3.1添加5 L(对于50μg蛋白质)或10L(对于100μg蛋白质),其为TQ染色猝灭缓冲液(组分C)的总反应体积的10%到缀合反应混合物中(来自步骤2.2),将它们混合 好。

3.2在室温下孵育10分钟。

3.3标记的蛋白质(抗体)现在可以使用了。


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