Cell Meter™ Live Cell Caspase 3/7 Imaging Kit

Cell Meter 活细胞免洗胱天蛋白酶3/7成像试剂盒使用我们近期开发的可渗透细胞的荧光胱天蛋白酶底物ApoSight Green Caspase 3/7（荧光探针）直接检测活细胞中的胱天蛋白酶活性。 ApoSight Green Caspase 3/7底物由三个部分组成，包括a）荧光团，b）半胱天冬酶选择性肽片段（DEVD），以及c）细胞穿透部分。细胞穿透部分将探针带入活细胞。进入活细胞后，半胱天冬酶选择性肽片段被半胱天冬酶裂解以释放荧光团。恢复的荧光强度与要测量的胱天蛋白酶的活性直接相关。与活细胞中现有的半胱天冬酶测定相比，ApoSight Green Caspase 3/7底物更加稳定，方便和准确。 ApoSight 绿色胱天蛋白酶3/7底物释放出Ex / Em〜490/520 nm的荧光团。如NucView试剂所报道的，它不需要DNA相互作用即可发荧光。如FMK肽探针所报道的，它不抑制胱天蛋白酶活性。尽管胱天蛋白酶的荧光FMK肽抑制剂被广泛用于检测活细胞中的胱天蛋白酶活性，但是该技术有一些严重的局限性：a）FMK半胱天冬酶抑制剂具有很高的细胞毒性，因为FMK肽与活性胱天蛋白酶共价结合。 b）FMK肽与caspase的不可逆共价结合会抑制caspase活性，导致假阳性凋亡。 C）FMK分析具有极高的本底，并且需要大量洗涤，从而导致低的通量。 d）FMK肽在水溶液中不稳定，必须立即使用。 Cell Meter 活细胞免洗Caspase 3/7成像试剂盒提供了优化的荧光成像测定法，用于检测caspase3 / 7活性。该检测可以使用96孔或384孔板进行实验，并易于适应自动化。