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产品详情

Cell Counting Kit CCK-8 WST-8 试剂盒

  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:Cell Counting Kit CCK-8 WST-8 试剂盒
  • 产品型号:35000
  • 产品展商:Biolite
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍

Cell Counting Kit CCK-8 WST-8 试剂盒简称CCK8试剂盒,是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的Cell Counting Kit CCK-8 WST-8 试剂盒快速高灵敏度检测试剂盒。

产品描述

检测原理:

◆ Cell Counting Kit 简称CCK8试剂盒,是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

◆ WST-8 属于MTT的升级产品,工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物( formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。

◆ CCK8 法应用非常广泛,如**筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

CCK8 方法的优势:

◆ 此图表反映了CCK8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

检测方法

MTT 

XTT 

WST-1 

CCK8 

甲臜产物的水溶性

差(需加有机溶剂溶解再检测)

产品性状

粉末

2 瓶溶液

溶液

1 瓶溶液

使用方法

配成溶液后使用

现配现用

即开即用

即开即用

检测灵敏度

很高

很高

检测时间

较长

较短

较短

*短

检测波长

560-600nm

420-480nm

420-480nm

430-490nm

细胞毒性

高,细胞形态完全消失

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

试剂稳定性

一般

较差

一般

很好

批量样品检测

可以

非常适合

非常适合

非常适合

便捷程度

一般

便捷

便捷

非常便捷

 

  ◆ 酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰;

  ◆ 细胞毒性非常低,因此加入 WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到*佳测定时间。

CCK 法的操作步骤(更多内容请见说明书):

实验一:细胞活性检测

1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5% CO2)。

2、向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。

3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

5、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。

实验二:细胞增殖-毒性检测

1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。

2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。

3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。

4、向每孔加入10μL CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。

5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。

注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉**影响。当然**影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入**后的空白吸收即可。

活力计算:

细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100
A(加药):具有细胞、CCK溶液和**溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有**溶液的孔的吸光度
细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力

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4.  可标记蛋白质和寡核苷酸 
 
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8. 多种酶检测试剂盒 
 
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11. 显色底物 
 
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