西安百萤生物科技有限公司 主营:百萤生物围绕荧光发光、荧光标记、荧光探针等技术进行产品研发,公司产品广泛用于核酸蛋白定量、细胞凋亡研究、细胞信号通路研究、细胞及线粒体膜电位检测、细胞器染色、活体示踪、抗体标记等科研领域。
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产品详情

钙离子指示剂EGTA, AM CAS 99590-86-0

  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:钙离子指示剂EGTA, AM CAS 99590-86-0
  • 产品型号:21005
  • 产品展商:AAT Bioquest
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍

钙离子指示剂EGTA, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子指示剂

产品描述


        钙离子指示剂EGTA, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子指示剂,EGTA是为被广泛使用的钙离子选择性的螯合剂。它与钙离子形成的复合物比与镁离子形成的复合物要稳定100,000倍。它被用来制备钙缓冲液和控制钙离子的浓度。EGTA, AM是EGTA的乙酰甲酯衍生物,通过AM法,能被轻易负载到细胞中。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供的钙离子指示剂EGTA, AM。 

产品说明书

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM EGTA AM * CAS 99590-86-0 *储备液。
2.1EGTA AM * CAS 99590-86-0 *使用量:1 mg
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg EGTA AM * CAS 99590-86-0 *与747.83μL无水DMSO混合。

3.使用10μMEGTAAM * CAS 99590-86-0 * 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1EGTA AM * CAS 99590-86-0 *的孔内浓度:5μM
3.2Pluronic®F-127的井内浓度:0.04%
3.3孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μLEGTAAM * CAS 99590-86-0 *,25.6μL10%Pluronic®F-127和256μL25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议EGTA AM * CAS 99590-86-0 *的浓度为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度为0.02%至0.04%。
注意:推荐的浓度为1至2.5 mM的Probenecid。

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的浓度调节至以下:5μMEGTAAM * CAS 99590-86-0 *,0.04%Pluronic?F-127,1mM丙磺舒。

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = / nm运行实验。

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