染色细胞分析方案
以下程序适用于大多数细胞类型。 生长培养基,细胞密度,细胞类型和其他因素可能影响染色。 玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物染色,导致在没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。
通过离心沉淀细胞并将细胞重悬于缓冲盐溶液或培养基中,经过测试染料的佳结合pH为7.4。培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。Hoechst的染色浓度为0.5-5μM,并将其孵育15至60分钟。在初的实验中,好在整个建议范围内尝试几种染料浓度,以确定产生佳染色的浓度。
参考文献
Amine terminated G-6 PAMAM dendrimer and its interaction with DNA probed by Hoechst 33258
Authors: Choi YS, Cho TS, Kim JM, Han SW, Kim SK.
Journal: Biophys Chem (2006): 142
Design of new bidentate ligands constructed of two Hoechst 33258 units for discrimination of the length of two A3T3 binding motifs
Authors: Tanada M, Tsujita S, Sasaki S.
Journal: J Org Chem (2006): 125
DNA sequence recognition by Hoechst 33258 conjugates of hairpin pyrrole/imidazole polyamides
Authors: Correa BJ, Canzio D, Kahane AL, Reddy PM, Bruice TC.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2006): 3745
Recognition of B-DNA by neomycin--Hoechst 33258 conjugates
Authors: Willis B, Arya DP.
Journal: Biochemistry (2006): 10217